多肽的溶解
每个氨基酸都具有固有的化学性质，肽的溶解度取决于其序列和修饰。我们建议在溶解所有肽之前取少量肽进行溶解度测试。
溶解肽是非常重要的一步。溶解不当可能会导致肽损失或实验失败。肽的溶解度主要取决于肽的序列，因此在设计肽时要注意。建议肽序列应包含 20% 带电残基以增加其溶解度。
在使用前，客户可以遵循以下三个基本原则来选择合适的溶剂来溶解肽。
首先，所选溶剂必须能够充分溶解肽；其次，所选溶剂必须与实验条件相适应；最后，所选溶剂不得与肽发生反应或降解肽。
只要肽量允许，可以先溶解一小部分肽，然后溶解整个样品。如果您需要从溶剂中回收肽，您可以选择一种初始溶剂，使其在冻干后易于去除。
以下建议可能会帮助您溶解肽：
少于5个氨基酸的肽一般可溶于水溶液，强疏水性氨基酸（W、I、L、F、M、V、Y）除外。
If the charged amino acids are evenly distributed throughout the sequence, then contains >25%带电氨基酸（E、D、K、R、H）的亲水肽并含有<25%Peptides with hydrophobic amino acids are generally soluble in aqueous solutions. The purification system for peptides is generally 0.1% TFA/Water and 0.1% TFA/ ACN. Therefore, if the peptide is dissolved in a buffer with no or very weak buffering capacity, the result may be an acidic peptide solution. When using other methods to dissolve peptides, be sure to use a solvent that is pH The value is nearly neutral. acidic peptide (E+D The number of residues is more than K+R+H number of residues) and basic peptides (K+R+H The number of residues is more than E+D number of residues) in neutral pH value conditions than in acidic pH value is easier to dissolve.
For hydrophobic amino acid content is 50% ～75%peptide, even if the sequence contains >25%带电氨基酸也可能不溶于或部分溶于水。最好首先将肽溶解在最少量的强有机溶剂中，例如 DMF、ACN、异丙醇、乙醇、乙酸、4-8 M GdnHCl、尿素或 DMSO（不按 C、W、M 顺序）和其他类似有机溶剂。最好将溶解肽的有机溶剂慢慢滴加到水溶液中。如果溶液变得浑浊，则可能已达到溶解度极限，继续溶解已无用处。需要注意的是，最初选择的溶剂应与实验体系兼容。
Hydrophobic amino acid content >75%强疏水性肽一般也不溶于水溶液。此类肽也应首先用强有机溶剂（例如 TFA、甲酸）进行处理，溶解后如果添加到水溶液中也可能会沉淀。最终的肽溶液可能需要高浓度的有机溶剂来使其变性，并且有机溶剂通常不用于活细胞的生物功能研究。
S, T, E, D, K, R, H, N, Q, Y High content (>75%) 多肽序列倾向于形成多余的分子间氢键网络，并且在浓水溶液中容易形成凝胶。此类肽可以按照步骤3中的描述进行溶解。为了减少溶解过程中可能出现的问题，建议客户多加注意设计和序列，以提高肽的溶解度。