树脂充分溶胀
称取 2.0 g 空白 Wang 树脂于洁净干燥的反应管中，加入 15 mL DMF，室温活化 30 min 左右。
取第一个氨基酸
室温下，通过砂芯滤出上一步溶剂，加入 1 mmol 5 摩尔过量的 C1 末端氨基酸、5 倍摩尔过量的 DMAP、5 摩尔过量的 DIC、DMF 做溶剂，室温反应 3 h。反应完成后用DMF洗涤4~6次，每次5-6mL。然后加入适量吡啶和醋酐，体积比为1:1，反应30min。反应完成后用DMF洗涤4~6次，每次5-6mL。 （效果：阻挡未反应的空树脂上的活性微粒。）
Fmoc 保护基团的脱离
抽滤除去上一步溶剂，将10 mL 20%哌啶DMF溶液加入到树脂中，N2搅拌10 min，最后过滤溶液，加入10 mL 20%哌啶DMF溶液，N2吹搅拌5 min，然后滤出溶液，重复此操作两次。 DMF洗涤4次，甲醇洗涤2次，每次5-6mL。
测试茚三酮去除效果
取出少量树脂，用甲醇洗涤3次，加入茚三酮、KCN、苯酚溶液各1滴，105℃—110℃加热5min，变深蓝色为阳性反应，表明去除完成，可进行下一步反应；如果为无色，说明保护基尚未完全脱除，需要重复上述脱保护操作。
然后第二个氨基酸和Fmoc保护基团去除
称取3倍摩尔过量的C2结尾的第二个氨基酸、3倍摩尔过量的HBTU和3倍摩尔过量的HOBT于反应管中，加入适量DMF，待溶液完全溶解后，加入10倍摩尔过量（纯）DIEA，室温反应40 min，用DMF洗涤4~6次，每次5-6次mL。取少量树脂用茚三酮检测试剂检测，显无色，然后加入10 mL 20%哌啶DMF溶液去除Fmoc，重复两次，每次10 min，5 min，用DMF洗涤4次，用甲醇洗涤2次，每次5-6 mL。取出少量树脂用茚三酮检测试剂检测。如果检测结果呈蓝色，则可以进行下一步反应。
以此类推，重复步骤2.6，直至合成为N，除去Fmoc Protect碱末端最后一个氨基酸，然后沥干。
树脂脱落及纯品分离及检测
最后用三氟乙酸切割液(95%TFA:2%TIS:2%EDT:1%H2O)切割2h，抽滤反应液，得到多肽的三氟乙酸溶液。将裂解液尽可能用氮气吹干，用乙醚沉淀，离心，然后用乙醚洗涤3秒。 ～5次，得到白色固体。纯水溶解后，HPLC脱盐纯化，冷冻-干燥析出晶体，取少量MS分析。